人乳头瘤病毒分型及液基薄层细胞检测在宫颈病变筛查中的价值分析
发布时间：2023-02-27 点击：
发布：本期刊
摘 要：目的：探讨人乳头瘤病毒(HPV)分型及液基薄层细胞检测(TCT)在宫颈病变筛查中的价值。方法：选取2021年3-12月在湖南省人民医院经HPV筛查阳性的1 430例患者为研究对象，并统计其中行TCT的1 238例患者HPV分型的感染情况，并从细胞学水平对宫颈病变程度进行分析。结果：HPV亚型单一感染814例，多重感染616例。最常见的低危型为6、11型，高危型为52、58、16型。不同年龄段TCT结果比较，差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈高级别病变患者均为高危型HPV感染，其中50～59岁患者的病变率最高。结论：宫颈高级别病变与高危型HPV感染具有相关性，HPV分型及TCT应用于宫颈病变筛查，有助于宫颈癌的早发现、早治疗，具有较高的临床应用价值。
关键词: HPV分型; TCT; 宫颈病变;
人乳头瘤病毒(HPV)是全世界人群中高度流行的人类病原体，是最常见的性传播感染因子之一[1]。虽然大多数HPV感染(70%～90%)者无症状，并且会在1～2年内自行消退，但持续感染(或多次再感染)会导致癌变，病情严重者甚至死亡[2]。据统计，全球4.5%～5.2%的癌症归因于HPV，其中宫颈癌造成了较大社会影响[3]。浸润性宫颈癌的发病率和死亡率在女性癌症中排名第四，2020年有超过60万例宫颈癌新病例和34万例死亡病例[4,5]。国际癌症研究评估机构将HPV分为高风险和低风险2种类型，高风险HPV与宫颈癌病变密切相关[6]。因此，HPV分型检测对于宫颈癌的早期筛查及积极防治具有至关重要的作用。本研究分析HPV感染病例的分型和液基薄层细胞检测(TCT)结果，探讨其在宫颈癌病变筛查中的应用价值，以期为宫颈癌的防治提供理论依据，现报告如下。
资料与方法
选取2021年3-12月在湖南省人民医院经HPV筛查阳性的1 430例患者为研究对象，并统计其中行TCT的1 238例患者的HPV结果。1 430例患者中，男86例，女1 344例；年龄14～85岁，平均(30.00±0.23)岁。本研究经院医学伦理委员会审批，研究对象均对本研究知情同意。
纳入标准：(1)行HPV筛查，首次确诊为HPV阳性；(2)未确诊宫颈相关重大疾病；(3)未做过任何宫颈部位手术；(4)行TCT的患者为同时在湖南省人民医院行HPV筛查采样。
排除标准：(1)HPV感染复诊的患者；(2)确诊宫颈相关重大疾病的患者；(3)曾做过宫颈部位相关手术的患者。
方法：(1)采用窥阴器充分暴露宫颈，将一次性宫颈刷置于宫颈口，顺时针旋转宫颈刷5～10圈，获取宫颈脱落细胞样本，将其保存于HPV及TCT采样管中，及时送检。(2)HPV分型检测使用泰普生物科学的人乳头瘤病毒(23个型)基因分型检测试剂盒(PCR-反向点杂交法)，提取样本DNA，再经杂交技术对23种HPV亚型进行检测。具体检测步骤按照试剂盒说明书进行。(3)TCT：本研究按照伯塞斯达系统宫颈细胞学分类法进行阅片，结果分为未见上皮内病变或恶性性病病变变((NNIILLMM))、、无无明明确确意意义义的的非非典典型型性性鳞鳞状状细细胞胞(ASC-US)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、不除外高级别鳞状上皮内病变的非典型性鳞状细胞(ASC-H)、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)。TCT结果先后经2位医师评估审核，所有分级差异通过讨论解决，确保TCT分级结果的准确性。
观察指标：(1)观察各HPV阳性患者感染的具体亚型；(2)HPV阳性患者行TCT，观察其宫颈鳞状上皮细胞的病变情况。
统计学方法：数据应用SPSS 19.0统计学软件分析；计数资料以[n(%)]表示，采用χ2检验；P<0.05表示差异有统计学意义。
结果
HPV型别统计：本研究收集了1 430例HPV阳性病例，其中感染1种HPV亚型814例，占比56.92%；感染≥2种HPV亚型616例，占比43.08%。单一感染的病例中，感染低危型HPV 70例，感染高危型HPV744例；多重感染的病例中，低危型HPV感染频次为314次，高危型HPV感染频次为1 350次。HPV低危型6、11、42、43、44、CP8304型的感染频次分别为103、82、50、63、45、41次；HPV高危型16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82型的感染频次依次为244、63、53、68、22、129、18、131、463、181、104、274、87、145、87、16、9次。低危型HPV中最常见的型别均为6型(26.82%)；高危型HPV中52型最为常见(22.11%)，其次为58型(13.09%)和16型(11.65%)。本研究将1 430例HPV阳性病例按年龄分成8组，<20岁占比2.38%、20～29岁占比21.12%、30～39岁占比37.13%、40～49岁占比17.41%、50～59岁占比19.37%、60～69岁占比8.53%、≥70岁占比4.06%。每个年龄阶段均有HPV亚型单一感染、多重感染、低危型感染和高危型感染。单一感染占比最多的年龄组为30～39岁(30.10%)；多重感染最多的为20～29岁(25.32%)。30～39岁组在低危型感染和高危型感染中均占比最高(30.61%,26.88%)
不同宫颈病变程度的HPV感染情况分析：在1 430例HPV感染阳性病例中有1 238例进行了TCT，其中NILM 474例，ASC-US 388例，LSIL 303例，ASC-H 25例，HSIL 48例。NILM在多重感染病例中的占比低于单一感染，差异有统计学意义(P<0.05)。在HPV低危型感染病例中，无ASC-H和HSIL病变；但HPV高危型感染病例中，LSIL、ASC-H和HSIL比例均明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
表1 不同程度宫颈癌病变中HPV感染情况[n(%)]
不同年龄段HPV感染的TCT结果比较：<20岁患者中无ASC-H和HSIL;NILM、ASC-US和LSIL均为30～39岁患者发生率最高；ASC-H于50～59岁和60～69岁发生率最高；而HSIL于50～59岁发生率最高。不同年龄组中TCT结果比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。
表2 不同年龄段HPV感染的TCT结果比较[n(%)]
讨论
HPV感染与宫颈癌的发生、发展有着密切关系。由于过早的性行为和无防护性行为增多，使得HPV感染人数不断增多。预计2030年，宫颈癌的新发病例和死亡人数将分别升至70万和40万[7]。
本研究共统计了1 430例共23种HPV亚型感染阳性病例，分析发现，其以单一感染为主，并且绝大部分为高危型感染，而低危型HPV感染中多伴随高危型多重感染。低危型感染病例中以6和11型感染为主，这与前期报告的HPV低危型分布一致[8]。HPV6型具有增强子和转化功能，能独自诱变所有级别的宫颈癌病变。本研究的高危型感染病例中52、58、16型依次排感染率前三位，其与矛书为等[9]对南京市女性宫颈癌筛查HPV分型检测结果相符，但与其他文献报告的高危型感染以16、52、58型或者16、52、18型为感染率前三位略有不同[10]。该结果的不一致系地域或民族的差异导致，但均符合亚洲人群HPV亚型分布特征。
本研究中，HPV感染主要集中在20～59岁年龄段，也有少数<20岁，此结果与袁建晖等[11]的研究结果相符。这可能<20岁女性初次性行为较早，宫颈发育还未完全成熟等有关。虽然<20岁年龄段也存在一定比例的HPV感染阳性患者，但是其无TCT结果为ASC-H和HSIL，这与钟泽艳等[12]的报告相符。考虑此现象可能是该年龄患者为初次感染导致。HPV感染主要集中在20～59岁年龄段，与此年龄段人群常规筛查基数较多或更关注健康检查有关。TCT结果中ASC-H和HSIL均在50～59感染最多，这是由于此年龄段女性体内雌激素水平降低，处于围绝经期或更年期，机体免疫力紊乱，宫颈结构发生改变，并且免疫功能较差，HPV感染后难以自我转阴，导致持续阳性[13]，因此，该年龄段女性要做好HPV的定期复查，早发现，早治疗。
宫颈癌的发生、发展是一个复杂的过程，由高危型HPV的持续性感染所引起[14]。本研究也印证了这一说法，TCT结果为ASC-H和HSIL的患者均为高危型HPV感染，这说明宫颈高级别病变与高危型HPV感染有相关性。
综上所述，HPV分型和TCT被广泛用于宫颈癌筛查，两者联合检测能显著提高宫颈癌筛查的准确性。HPV筛查对早期治疗宫颈上皮内病变、降低宫颈癌发病率和死亡率具有重要意义。
